ПЦР или полимеразная цепная реакция является высокоточным методом молекулярно-генетической диагностики, позволяющей выявлять разные наследственные и инфекционные недуги человека. Анализ даёт возможность обнаружить заболевание ещё до того момента, когда о себе дадут знать первые симптомы.
ПЦР была разработана американцем Кэри Мюллисом в 1983 году. А спустя 10 лет учёный был удостоен Нобелевской премии в области химии.
На сегодняшний день большинство медиков не представляют себе, как можно поставить точный диагноз, если не сдан ПЦР анализ. Он на самом деле стал настоящей находкой и для специалистов, и для пациентов. Метод позволяет выявлять активные стадии патологии даже тогда, когда не срабатывают иммунологические, вирусологические, бактериологические методы диагностики.
Преимущества ПЦР-диагностики
Разобравшись немного с тем, что такое ПЦР диагностика, необходимо сказать о неоспоримых плюсах методики.
К таким стоит отнести:
- Точное выявление возбудителя в образце, который был сдан на исследование. Речь идёт о специфических участках РНК либо ДНК.
- Благодаря высокой специфичности, есть возможность определять особый участок РНК и ДНК, который является характерным для определённого возбудителя. Это даёт возможность исключить ложные реакции.
- За счёт высокой чувствительности можно обнаружить и единичные возбудители бактерий или вирусов. Чувствительность ПЦР анализа – 1000 клеток в образце, который был сдан на анализ. Что касается чувствительности микроскопических и иммунологических тестов, то она составляет не более 105 клеток.
- Методика ПЦР является универсальной и даёт возможность из одной пробы выявить сразу несколько возбудителей.
- >,Результаты анализа могут быть готовы менее чем за 5 часов.
- Выявление патогенов в доклинической диагностики (когда симптомы заболевания ещё не проявились) и в ретроспективной диагностике (когда человек уже переболел).
Диагностика ПЦР имеет большое значение тогда, когда материал, взятый на анализ, был на время отправлен в архив. А после, проводя исследования, специалисты могут узнать то, что им нужно. Например, установить отцовство или личность человека.
На сегодняшний день диагностика ПЦР заметно совершенствуется, появляются её разновидности, позволяющие сделать метод исследования более простым и доступным.
На чем основывается метод
Основой реакции является удвоение конкретного участка РНК либо ДНК в лабораторных условиях с помощью ферментов. В результате амплификации (удвоения) удаётся получить нужное количество ДНК, РНК, которые подвергаются визуальному анализу. Во время процедуры копированию подлежит участок, идеально подходящий под определённые условия и имеющийся в исследуемой пробе.
Допустим, есть исследуемый материал и в нём наблюдается наличие частичек РНК либо ДНК возбудителя. Это может быть кровь, моча, выделения из половых органов или слюна. Этот материал помещают в амплификатор – особенный реактор. После этого добавляют ряд специальных ферментов – они связывают ДНК или РНК патогена, в результате чего получается хорошая копия. Нужно сказать, что копий может быть как несколько штук, так и несколько тысяч. По завершении этого процесса начинается сравнение результатов с базой, в которой описано строение разных возбудителей.
С помощью ПЦР будет возможность не только выявить возбудителя, но и назвать точное количество патогенов, которые находятся в человеческом организме.
Какие инфекции позволяет выявить ПЦР-диагностика:
- ВИЧ-инфекцию.
- Все виды вирусных гепатитов (а это А, В, С, G).
- Цитомегаловирусную инфекцию (ДНК-CMV).
- Инфекционный мононуклеоз (ДНК вируса Эпштейн-Барр -ВЭБ).
- Туберкулез (найти микобактерию туберкулёза).
- Герпетическую инфекцию (ДНК вируса простого герпеса ВПГ 1 и второго типа).
- Венерические заболевания и половые инфекции (хламидиоз, уреаплазмоз, трихомониаз, гарднереллез, микоплазмоз).
- Листериоз.
- Хеликобактерную инфекцию.
- Онкогенные вирусы (папилломавирусную инфекцию и её онкогенные вирусы).
- Боррелиоз, клещевой энцефалит.
- Кандидоз – молочницу (выявляют грибы рода Candida).
И это далеко не весь список тех инфекций, которые можно определить при помощи теста.
ПЦР-тест – «золотой стандарт» при выявлении возбудителей большинства инфекционных заболеваний.
Принимая во внимание роль ПЦР, его назначают врачи различных областей. Это урологи, гематологи, фтизиатры, гинекологи, гастроэнтерологи, онкологии, инфекционисты и другие.
Правила забора материала для исследования
Если необходимо определить инфекции, передающиеся половым путём, тогда берут мазок на ИППП методом ПЦР, то есть используют соскоб с шейки матки, из уретры. Кроме этого, собирают выделения из полового члена у мужчин и влагалища у женщин.
В случае, когда необходимо обследоваться на инфекции, например, гепатиты С и В, ВИЧ, мононуклеоз, вирус герпеса, токсоплазмоз и ЦМВИ, тогда берут кровь на ПЦР.
Нередко, когда с целью выявления ЦМВИ, необходимо сдать анализ мочи. А дабы определить вирус герпеса или инфекционный мононуклеоз, используют мазок из зева.
Намного реже в качестве исходного материала используется спинномозговая жидкость. Обычно это необходимо при поражении ЦНС человека.
Если говорить о внутриутробных инфекциях, то для их выявления используют ткань плаценты или околоплодные воды.
В пульмонологии исходным материалом является плевральная жидкость либо мокрота.
Нужно сказать, что в качестве материала, используемого для исследования, может использоваться как жидкость человека, так и биологическая среда. Речь идёт о моче, мокроте, крови, соке простаты, плевральной жидкости, слизи и т.д.
Как подготовиться к проведению диагностики
Несмотря на то что взятый на анализ мазок ПЦР будет исследован в самое ближайшее время, а пациенту выданы его результаты, некоторые люди переживают относительно точности анализа. Конечно, многое зависит от доктора, который берёт забор материала, приборов, но отчасти на процесс влияет и сам пациент. Каждый, кто имеет факторы риска способствующие инфекционным заболеваниям, должен знать, как сдавать ПЦР на ИППП и другие дисфункции организма правильно.
Чтобы не было никаких сомнений в результате анализа, следует выполнять следующие правила:
- Если сдаётся ПЦР на венерические заболевания, то нельзя заниматься любовью без барьерных контрацептивов.
- При сдаче крови на ИППП и другие инфекции это делается исключительно натощак. Ни о каком утреннем чаепитии и завтраке не может быть и речи.
- При сдаче мочи забирается только первая утренняя жидкость в чистую ёмкость.
Где сдать анализ и через сколько можно получить результаты
Что касается того, где сдать ПЦР, то сегодня есть возможность это сделать в любой частной клинике или лаборатории. В любом случае врач, который направит на анализ, подскажет, куда лучше обратиться. Что касается готовности результата, то его можно будет забрать через пару дней. Во многих случаях пациент получает «бумагу» в тот же день.
Расшифровка результатов
Есть несколько видов расшифровки, в зависимости от получаемого результата.
А именно:
- Отрицательный результат. Он говорит о том, что на момент сдачи анализа в исследываемом материале не было замечено никаких инфекционных составляющих. В подавляющем большинстве случаев анализ именно такой.
- Положительный результат. Если будет указано подобное, то можно с большой точностью сказать о том, что в исходном материале найдены следы определённых инфекций.
Иногда у людей обнаруживается так называемое «здоровое носительство». Это происходит тогда, когда человек чувствует себя хорошо, у него нет никаких симптомов, которые бы указывали на наличие инфекции, а анализ говорит об обратном. Такое бывает, когда сдаётся ПЦР на ИППП, на герпес, ВЭБ-инфекцию, ЦМВИ, ВПЧ и т.д.
Стоит знать! Если анализ ПЦР оказался положительным, человек является носителем определённой инфекции, которая может передаваться другим. Именно поэтому запускать ситуацию нельзя.
Нужно понимать, что все инфекции разные, одни требуют незамедлительного лечения, за другими необходимо только наблюдать. Решение, что делать дальше в этом случае должен принимать исключительно доктор. Специалист же на основе результатов поставит диагноз и назначит лечение, если оно требуется.
Что касается того, насколько точен анализ ПЦР, то для этого используют такие определения:
- Максимальная точность (диагностика позволяет выявить наличие инфекции или «сообщить» об её отсутствии практически со 100% точностью).
- Специфичность (выявление именно конкретной инфекции).
- Чувствительность (даже если исследуемого материала мало, выявить возбудителя, в случае когда он есть, не составит труда).
Согласно исследованиям, ПЦР практически никогда не выдаёт неправдивых результатов. То есть, если инфекции нет, то и положительной пробы не будет. Крайне редко подобное бывает с хронической инфекцией, которая находится в неактивной фазе. В этом случае полимеразная цепная реакция может быть положительной.